BODIPY 493/503 脂滴绿色荧光检测实验方法（参考）

1. BODIPY 493/503 工作液的配制

1.1 制备储存液

用 382 μL 无水 DMSO 稀释 1 mg BODIPY 493/503 去配制 10 mM 的储备液。

【注】：BODIPY 493/503 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。

1.2 工作液的配制

用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 BODIPY 493/503 工作液。

【注】：请根据实际情况调整 BODIPY 493/503 工作液浓度，且现用现配。

2. 细胞染色 (悬浮细胞)

2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL

2.2 加入 BODIPY 493/503 工作液，通常 96 孔板每孔加入 100 μL，24 孔板每孔加入 250 μL，12 孔板每孔加入 500 μL，6 孔板每孔加入 1 mL。室温避光孵育 5-30 分钟。

2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。

2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。

2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

3. 细胞染色 (贴壁细胞)

3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。

3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，避光孵育 5-30 分钟。

3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

染色结果参考：